Determinazione della frazione mutata di NPM1 nell'AML mediante dPCR

La mutazione del gene NPM1 (Nucleofosmina) è una delle mutazioni acquisite più frequentemente osservate nella leucemia mieloide acuta (AML). Tra i numerosi tipi di mutanti NPM1, la mutazione di tipo A rappresenta l'80%. Il monitoraggio di questo marcatore è indicato di routine nella gestione della LMA. Attualmente viene monitorato mediante RT-qPCR. I risultati sono espressi come rapporto "mutato/normale" di mutanti NPM1 e richiedono l'uso di un gene di riferimento.La PCR digitale è una tecnologia recente che consente la quantificazione assoluta di un evento genetico raro. I punti di forza della PCR digitale sono numerosi: il gene di riferimento è identico al target di interesse, la sensibilità è praticamente identica a quella della RT-qPCR e non è necessario utilizzare saggi plasmidici. In questo contesto, abbiamo sviluppato un metodo di PCR digitale per il biomarcatore NPM1 di tipo A, determinando i parametri ottimali della tecnica per questo rilevamento. In conclusione, la PCR digitale sembra essere uno strumento importante per il monitoraggio della malattia residua.

Especialista assistente em Hematologia, Instituto Gustave ROUSSY, Villejuif, França. Antigo residente em hematologia, Hospital Universitário de Grenoble, França. Médico de clínica geral, Faculdade de Medicina, Teerão, Irão.