Genoombewerking met het CRISPR Cas9-systeem

Genome engineering staat aan het begin van een gouden eeuw. Nieuwe en spannende gereedschappen worden toegevoegd aan het arsenaal. Na TALEN's en Zing-finger komt er een nieuw en veelbelovend hulpmiddel bij. De nieuwste toevoeging is het CRISPR-systeem. Een systeem dat voor het eerst werd ontdekt bij Streptococcus thermophilus en zijn natuurlijke rol is de sequentiespecifieke adaptieve immuniteit tegen vreemd DNA in bacteriën. In dit rapport wordt CRISPR Cas9, type II systeem, gebruikt in een poging om het HPRT1-gen dat tot expressie komt in lymfocyten uit te schakelen als proof of concept. HAT-medium in combinatie met thioguanine wordt gebruikt als selectiemedium voor een snelle en eenvoudige uitleesscreeningmethode. Om te controleren of er een succesvolle bewerking heeft plaatsgevonden in de zoogdiercellen, wordt een detectiekit voor DNA-splitsing gebruikt in combinatie met een enzymatische test.

Paris se licenció en el Departamento de Biotecnología del Real Instituto de Tecnología KTH y realizó su proyecto de máster en el Hospital Universitario Karolinska. Karolinska. Anteriormente, obtuvo un máster y una licenciatura en biología aplicada en la Universidad de Ioannina. Actualmente cursa un doctorado en Ingeniería Genómica en la Universidad de Manchester.