Produzione di HFS da parte della glucosio isomerasi isolata da E.coli DH5 Alpha

La xilosio/glucosio isomerasi è un importante enzima industriale, utilizzato da decenni per la conversione del glucosio in fruttosio. Questa ricerca si concentra sulla produzione di isomerasi del glucosio da Escherichia coli DH5-. Gli studi di ottimizzazione della fermentazione hanno mostrato che una maggiore quantità di estratto di lievito e di triptone ha aumentato la crescita cellulare e la temperatura ottimale per la crescita è stata di 37°C. La purificazione parziale della xilosio isomerasi è stata effettuata mediante trattamento termico e precipitazione con solfato di ammonio. L'80% del valore di cut off del sale ha prodotto la massima attività del concentrato enzimatico. La xilosio isomerasi ha mostrato la massima attività a 75 °C e a pH 8. L'attività enzimatica in condizioni ottimali è stata di 5,0 U/min/ml per E. coli DH5-. L'aggiunta di ioni cobalto e xilosio ha aumentato l'attività di 10-20 volte. L'attività specifica per E. coli DH5- era di 60,5 nmol/min/mg di proteina. Solo l'8% del massimo sciroppo di D-fruttosio è stato prodotto utilizzando 100mM di D-glucosio come substrato dopo 14 giorni di incubazione. Pertanto, E. coli DH5- non è un candidato migliore per la produzione di sciroppo di fruttosio.

Zaman Shazadi Butt licenciou-se no Instituto de Biotecnologia Industrial da Universidade de GC, Lahore.