De trypanocidale effecten van antilichamen tegen T. brucei-recombinant tubuline

T. b. brucei alfa- en bèta-tubuline-genen werden tot expressie gebracht in E. coli met behulp van het pTrP2-expressieplasmide en 3---indoleacrylzuur als inductor. De tot expressie gebrachte tubulines werden geanalyseerd met SDS-PAGE en bevestigd door Western blotting, waarin ze een identieke schijnbare molecuulmassa van 50 kDa hadden. De tot expressie gebrachte tubulines werden afzonderlijk opgelost in 8 M ureum en 20-voudig verdund, waarna ze werden geconcentreerd en uitgebreid gedialyseerd tegen MES-buffer. Na dialyse was de gemiddelde opbrengst voor zowel alfa- als bètatubuline 0,7 g per liter kweek. Polyklonale antilichamen werden geproduceerd in elk van de 56 konijnen die waren geïmmuniseerd met drie doses van de geconcentreerde tubulines van 150 -g of 450 -g per immunisatie per dier. Het effect van deze antilichamen op T. b. brucei-groei werd bestudeerd door T. b. brucei bloedstroom in tot 25% van de door konijnen gefokte antisera. De antisera van de andere konijnen remden T. b. brucei groei in cultuur. Deze resultaten tonen aan dat antilichamen tegen bacterieel tot expressie gebracht trypanosoom tubuline mogelijk niet cytotoxisch zijn voor T. b. brucei.

David Kateete (Doktorand, Makerere University, Kampala, Uganda) befindet sich derzeit in seinem letzten Ausbildungsjahr. Er interessiert sich für Pathogenbiologie und studiert derzeit Zell-Zell-Signalübertragung in Bakterien. Er ist außerdem Dozent in der Abteilung für Medizinische Mikrobiologie am Makerere University College of Health Sciences.